凡是阔叶树木屑都可以做培养料。配料应注意原料合适的配比、料水比和酸碱度，这些因素影响培养料的理化性质，与木耳菌丝生长发育有直接关系。配方一：锯木屑78%、稻糠18.5%、黄豆粉2%、石膏粉1%、生石灰0.5%。配方二：锯木屑86.5％，麦麸10％，豆饼粉2％，生石灰0.5％，石膏粉1％。配方三：锯木屑78%、麦麸20%、石膏1%、白糖1%。各配方配料含水量60%左右。一般用手捏拌好的培养料，指缝间有水迹，滴水不超过一滴为宜。
培养料最好用拌料机拌料，如果人工拌料，至少要保证“三三”制，也就是说，辅料先拌三遍，主料和辅料混合拌三遍，加水后再拌三遍。或者，先把辅料混合拌匀后，一层主料，一层辅料，混合后进行拌料，正反方向各2-3次就可以了。 培养料加水后，要拌匀，堆闷2小时，让其水分浸润湿透，不能混杂有干料，以免影响灭菌效果。
装袋可选用装袋机，该机装料打孔能一次完成，即节省人力，又保证了装袋的质量。袋一定要选用17×33cm的聚乙烯袋，因聚乙烯袋在低温时不易破损，质地柔软，易收缩，袋壁紧贴菌棒上，开口出耳时保湿性能好，喷水时不易使菌袋内积水，减少了出耳期的后期污染。装料要松紧适度，料松菌丝弱，易衰老，出耳时易污染，料过紧通气不良，发菌慢。一般每袋填料1.1-1.2公斤。装料后套上颈圈，压上盖。盖和料面应保持3-5cm空间高度。
