(1)木粒菌种培养基的制备
1)制作木粒 用刀具刮去阔叶树木枝条的外皮,再用木工锯截成长3厘米的木段。将木段分别加工成直径约3毫米的圆柱体或近似于圆柱体的木粒,再将木粒的1头尖端削圆呈锥形的徽小颗粒,置洁净的晒帘上晒干。
2)煮制木粒 于锅内按白糖1%,食盐0.5%,磷酸二氢钾0.2%,味精0.1%,水100%的比例搅拌混匀配制成煮液。将晒干后的木粒放入锅内煮液中淹没,搅拌使木粒浸水均匀,然后占火加温进行煮制。一边煮,一边播拌搅动,使木粒自然均匀的吸收煮液水分。水开锅后再煮沸20-30分钟,木粒含水量达到饱和时捞起,盛入竹篮或竹筐内,沥干表面水分。
3)备封口料 将杂木屑和麦麸按1:1即各50%的比例称量混匀,用煮液水拌至用手抓1小把紧握,指缝间有水珠形成并间断下滴为度(含水量70%左右)。
4)装料灭菌 将煮制好的木粒和拌好的封口料按10:1的比例混匀,装入500毫升医用生理盐水瓶内。木粒装至盐水瓶的瓶肩,木粒表面覆盖1层厚约1厘米的封口料,棉塞堵封瓶口。装完后放入太空灭菌包内或放入简易油桶灭菌锅内,在蒸气温度100摄氏度条件下,保持3-4小时,焖8-10小时后出锅。
(2)接种培养
接种用"四不型"食用菌无菌接种器,将紫红木耳PDA试管母种置接种器无菌净化装置与接种操作台组合的操作台架上,可不用电、不用药物、不用酒精、不用蒸气,免消毒灭菌,直接随机全开式取下试管口棉寒,用无菌接种锄将试管内的斜面母种菌丝分成5等份,钩出菌丝上端1厘米弃去。再取灭菌后的木粒料瓶置接种操作台架上,全开式取下瓶口棉塞,用无菌接种铲从母种试管内挑取分切成5等份中的1份菌丝块,接植在瓶内木粒料面上,棉塞回到瓶口,依次取木粒料瓶进行转接,每支试管母种可转接木料菌种5瓶。接种完毕,置25-28摄氏度洁净环境遮光培养,一般30天左右菌丝长满瓶,即可直接用于播种栽培。